WESTERN BLOTTING
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작성일 22-12-14 01:18
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이 때 이차항체에는 바이오틴이 결합되어 있어서 아비딘이 결합된 페록시다아제와 반응시키면 아비딘-바이오틴의 강력한 결합력 때문에 항원-일차항체-이차항체의 혼합체는 결국 페록시다아제를 가지게 된다된다. 시약조성에 제시된 대로 여러 시 약들을 혼합하여 separating겔을 먼저 붓고 나서 약 30분이내로 이것이 굳어 지면 stocking겔을 그 위에 붓는다.
2. 방법
여러가지 단백들을 함유하고 있는 혼합액을 SDS가 포함되어 있는 폴리아크릴아마이드겔에서 전기 영동하여 단백들을 크기에 따라 분리하여 나열시킨다.
2) 전기영동할 검체를 동량의 2 X SDS-PAGE loading buffer와 혼합한 후 100 ℃에서 약 2분간 가열한 다음 얼음 속에서 5분간 식힌 후 겔에 건다. 폴리아크릴아마이드 겔에 nitrocellulose 또는 nylon흡착지를 겹쳐 놓고 전기를 걸어 겔 속에 있던 단백들을 흡착지로 이동시킨다. 마지막 단계에서 과산화수소와 발색제를 함유한 반응액으로 처리하게 되면 페록시다아제에 의하여 과산화수소가 분해될 때 발생하는 발생기 산소는 발색반응을 일으키고 흡착지 위에 존재하는 단백은 띠 모양으로 나타나게 된다된다.
WESTERN BLOTTING의 원리, 방법, 용도, experiment(실험)절차를 정리한 자료입니다.
4. 實驗(실험)절차
1) SDS-폴리아크릴아마이드 겔을 준비한다.
3)전기영동은 1 X SDS-PAGE 완충액으로 처음에는 100volts(20mA)정도에서 스타트하여 염료가 Separating겔 속으로 …(省略)
순서
아무쪼록 도움이 되기를 바라며, 모두 좋은 결과 받으시길 바랍니다. 흡착지를 보합결합 주머니에 넣고 어떤 단백의 항체를 포함한 보합결합 용액과 함께 배양한 후, 다시 그 항체에 대한 항체와 반응시킨다.
레포트/공학기술
WESTERN BLOTTING의 원리, 방법, 용도, 실험절차를 정리한 자료입니다. 그러므로 면역 블롯팅이라고도 부른다. 아무쪼록 도움이 되기를 바라며, 모두 좋은 결과 받으시길 바랍니다.
3. 용도
어떤 단백이 일정한 세포속에 발현되고 있는가를 확인하거나 그 발현되는 단백의 크기 變化(변화)를 觀察(관찰) 하는데 이용된다된다. , WESTERN BLOTTING공학기술레포트 ,
설명
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WESTERN BLOTTING
다.
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1. 원리
2. 방법
3. 용도
4. 實驗(실험)절차
여러가지 단백들을 포함하고 있는 세포 또는 조직의 추출물을 전기 영동하여 그 속에 들어 있는 단백들을 크기 별로 구분한 다음 흡착지에 옮겨 놓고 조사하고자 하는 단백의 항체와 결합시켜 그 단백의 존재 유무와 크기등을 밝히는 검사이다.
