세포융합기술과 유전자 재조합
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작성일 22-10-02 16:13
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세포융합기술과 유전자 재조합
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세포융합기술방법에 대상으로하여 introduce하고 유전자 재조합의 관념과 그 관련 기술들에 대상으로하여 알아보았습니다. 이러한 상태에서 고전압을 단시간에 원형질체에 반복적으로 가하면 접촉한 두…(생략(省略))
세포융합기술방법에 대해서 소개하고 유전자 재조합의 개념과 그 관련 기술들에 대해서 알아보았습니다.
융합은 experiment(실험)대상의 두 원형질체를 같은 세포수만큼 experiment(실험)관에서 혼합하여 일정한 시간을 reaction 시키면 이들이 무작위적으로 서로 결합하여 다양한 조합의 유전형질을 가진 융합세포가 만들어지게 된다된다. 원형질체는 세포벽이 제거된 상태로 깨어지기 쉽다. 이러한 분극작용으로 두 개의 원형질체가 접근하여 전극과 평행적으로 접촉하게 된다된다. 따라서 고농도(0.5~1.0M)의 삼투압용액(설탕, 솔비톨, 만니톨)중에 넣어 알카리 금속이온(Ca, Mg, Mn)을 첨가하여 안정화시킨 상태에서 두 세포의 원형질체를 융합시켜야 안전하다. 세포융합(cell fusion, protoplast fusion)이란 서로 다른 형질을 가진 두 세포를 융합하여 두 세포의 좋은 형질을 모두 가진 새로운 우량형질의 잡종세포를 만드는 기술인 데 그 유도 과정을 요약하면 다음과 같다. 이 때 융합빈도를 높이기 위해서 세포막표면의 - 전하를 중화시켜 주어야 하므로 + 전하를 지닌 표면활성물질인 PEG(poly ethylene glycol), PVP(poly vinyl pyrrolidone) 및 알카리금속(Mg, Ca)을 첨가하여 중화시킨 후 융합하는 화학적 융합법이 보편화 되어 있다아
최근에는 전기적융합법(electro fusion)이 Zimmerman등에 의해 개발되었는데 융합빈도가 높고 여러 막구조물(엽록체, 미토콘드리아)의 융합에도 결과 적이어서 각광을 받고 있다아 이 방법에 의하면 전해용액중에 원형질체를 혼합한 후 고주파의 전기를 가하면 세포막상에서 전기적분해가 일어나 양극에 - 전하가, 음극에 + 전하가 모이게 된다된다. 세포벽이 완전히 제거되면 동그란 형태의 원형질체(protoplast)가 되는 데, 이 때 세포벽이 완전히 제거되지 않고 일부 잔존한 경우 spheroplaste라고 부른다. 동물세포와는 달리 식물이나 균류 및 미생물세포는 세포벽을 가지고 있으므로 세포를 융합시키기 위해서는 먼저, 세포벽을 제거해 주어야 한다.
